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Deteccion molecular del virus de la fiebre amarilla en muestras de suero de casos fatales humanos y en cerebros de raton.
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Deteccion molecular del virus de la fiebre amarilla en muestras de suero de casos fatales humanos y en cerebros de raton.

Author: Jairo A Mendez; Gerzain Rodriguez; Maria del Pilar Bernal; Dora de Calvache; Jorge Boshell
Edition/Format:   Article : Spanish
Publication:Biomédica, Vol. 23, no. 2 (jun. 2003) p.232-238
Database:WorldCat
Summary:
Hemos adaptado un metodo molecular basado en la tecnica de transcripcion reversa seguida de la reaccion en cadena de la polimerasa (RT-PCR) para diagnostico alternativo de la infeccion por el virus de la fiebre amarilla. Se tomaron tres sueros liofilizados de casos fatales de fiebre amarilla y cuatro sueros frescos, de los cuales tres pertenecian a casos fatales de la enfermedad y el cuarto a un paciente sintomatico  Read more...
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Details

Document Type: Article
All Authors / Contributors: Jairo A Mendez; Gerzain Rodriguez; Maria del Pilar Bernal; Dora de Calvache; Jorge Boshell
ISSN:0120-4157
OCLC Number: 70030156

Abstract:

Hemos adaptado un metodo molecular basado en la tecnica de transcripcion reversa seguida de la reaccion en cadena de la polimerasa (RT-PCR) para diagnostico alternativo de la infeccion por el virus de la fiebre amarilla. Se tomaron tres sueros liofilizados de casos fatales de fiebre amarilla y cuatro sueros frescos, de los cuales tres pertenecian a casos fatales de la enfermedad y el cuarto a un paciente sintomatico con serologia IgM positiva para fiebre amarilla; los sueros fueron tratados con Trizol-LS(para extraer el ARN viral que fue sometido a reaccion de RT y posteriormente a PCR, para la cual se disenaron dos parejas de iniciadores especificos de fiebre amarilla: iniciadores directos (sentido) JM2104 (5i-CGTTGGGAGAGGAGATTC-3i) y JM2249 (5i-TTCTTCACTTCGGTTGGG-3i), e iniciadores inversos (antisentido) JM2673 (5i-TCATCTGCCCTGCTTCTC-3i) y JM2751 (5i-CCTCTCTGGTAAACATTCT-3i). La aplicacion de la tecnica en tejidos se hizo en cerebros de raton infectados con el virus amarilico, tratados con una solucion de lisis antes de purificar el ARN. En geles de agarosa se observaron bandas unicas de amplificacion del tamano esperado (569 pb y 502 pb); todas las muestras fueron corroboradas con las dos parejas de iniciadores y en dos de las muestras de suero fresco los resultados positivos para fiebre amarilla fueron comprobados con estudio histopatologico. Este metodo de deteccion molecular permitio demostrar de manera r pida y eficiente la presencia del virus de la fiebre amarilla, hecho que tiene importantes implicaciones diagnosticas para este problema de salud publica. (AU).

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